产品货号：
WE0236
中文名称：
大片段Bst DNA聚合酶
英文名称：
Bst DNA Polymerase, Large Fragment
产品规格：
800U|4000U
发货周期：
已停产
产品价格：
已停产
Bst DNA聚合酶大片段是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，其基因来源于Bacillus stearothermophilus，并在原始序列的基础上进行了部分点突变。该蛋白具有5'→3' DNA聚合酶活性，无5'→3'和3'→5'核酸外切酶活性，具有强链置换活性。
Bst DNA聚合酶大片段应用于DNA等温扩增（LAMP）、多重置换扩增（MDA）、全基因组扩增（WGA）、建库测序等。
| 组分 | 800U | 4000U |
| Bst DNA聚合酶大片段(8U/μL) | 100μL | 2×250μL |
| 10×Bst Reaction Buffer | 1.5mL | 2×1.5mL |
| 100mM MgSO4 Solution | 1.5mL | 2×1.5mL |
保存：-20℃
在65℃，30分钟内，将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于98%；经检测无外源核酸酶活性，无宿主残余DNA。
酶热失活:
80℃温育20min即可失活。
以等温扩增（LAMP）操作为例：
将下列组分按比例混合后置于65℃温育30～60min。
| 成分 | 用量 | 终浓度 |
| 10×Reaction Buffer | 2.5μL | 1×（含2mM MgSO4） |
| MgSO4 (100mM) | 1.5μL | 6mM （共8mM） |
| dNTP Mix (10mM) | 3.5μL | 每种1.4mM |
| FIP/BIP Primers (25×) | 1μL | 1.6μM |
| F3/B3 Primers (25×) | 1μL | 0.2μM |
| LoopF/B Primers (25×) | 1μL | 0.4μM |
| Bst DNA聚合酶大片段(8U/μL) | 1μL | 320U/mL |
| DNA Sample | 可变 | ＞10拷贝或更多 |
| 无菌水 | 补充至25μL |
- LAMP引物由4个或6个(含Loop)引物组成，25×引物包括：40μM FIP，40μM BIP，5μM F3，5 μMB3，10μM LoopF，10μM LoopB。
- 如需优化反应，可调整Mg2+浓度（4～10mM），酶量（0.04～0.32U/μl）或改变反应温度（50～68℃）。
- 反应温度不超过70℃，不能用于热循环测序或PCR仪。
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